天狼猩红染色实验注意事项

　天狼猩红染色实验步骤
 
　　1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
 
　　2、天狼猩红染色液染色：切片入饱和枯萎蒜天狼猩红染色液内染色8min。
 
　　3、漂洗：切片入无水酒精漂洗数分钟，显微镜下观察满意为止。
 
　　4、封片：切片于60°烤箱烤干后于二甲苯透明5min，中性树胶封片。
 
　　5、显微镜镜检，图像采集分析。
 
　　染色结果：光学显微镜下胶原纤维红色，背景黄色。
 
　　注意事项
 
　　1、染液配制时,饱和枯萎蒜一定要过饱和,配制时要长时间搅拌后还有不溶的情况下才为饱和的。
 
　　2、饱和天狼猩红染液是一种两色混合染液,两种颜色同时都有作色能力,而且存在一定得制约平衡关系,所以染液在长期使用时随着带入的杂质过多,可能会影响这种平衡关系,所以建议染色结果不对时,应立即更换染液。
 
　　3、天狼猩红染色前，需要尽量将水甩干，避免多次染色后带入较多的水分使染液的染色能力下降。
 
　　4、染色后脱水时使用新的无水乙醇，并快速脱水，长时间脱水会影响染色结果。
 
　　5、如果需要染核，可以先染完天狼猩红后在用苏木素染核。